ELISA試劑盒以其特重復性好、異性強、敏感性高等優點,在科研中深受各大科研工作者的喜愛。
ELISA方法實驗常會出現一些結果不好的現象,小編總結了常見的幾大類問題和對應的解決方案,具體如下:
ELISA實驗結果顯色淡、靈敏度偏低
可能原因與具體解決辦法如下:
1、試劑盒在運輸途中時間太長,溫度太高
解決辦法:盡量縮短運輸時間,夏季應放冰塊降溫
2、試劑盒未充分平衡
解決辦法:試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)。
3、培養箱溫度不足37℃
解決辦法:注意培養箱溫度,放入反應板后盡量減少開啟次數以免影響溫度恒定,非隔水式培養箱尤其應注意
4、保溫時間不足
解決辦法:校正定時鐘準確定時
5、洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數增加
解決辦法:按說明書要求保留洗滌時間,準確記住洗滌次數
6、移液器吸液量不足,吸嘴內壁掛水太多或內壁不清潔
解決辦法:校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時要緊密,吸嘴內壁要清潔,*一次性使用
7、蒸餾水水質有問題
解決辦法:使用新鮮合格的蒸餾水
8、底物作用時間不足
解決辦法:準確定時